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產(chǎn)品名稱:

HT144人惡性黑色素瘤細(xì)胞

產(chǎn)品型號(hào): 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-29
HT144人惡性黑色素瘤細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。

產(chǎn)品概述

HT144人惡性黑色素瘤細(xì)胞

組織來(lái)源:皮膚
培養(yǎng)條件:McCoy 5a+10%FBS
形      態(tài):貼壁;成纖維細(xì)胞樣

1. HT-144細(xì)胞還沒有*長(zhǎng)滿的時(shí)候就要傳代,覆蓋瓶底大約70%的時(shí)候就開始傳代;

2.不存在消化時(shí)間太長(zhǎng)的說(shuō)法,我的細(xì)胞所有的細(xì)胞都在37°消化5-10分鐘,你的一分鐘肯定不會(huì)有問(wèn)題;

3.明確你的消化液里面有沒有EDTA,這個(gè)東西會(huì)很強(qiáng)烈地抑制細(xì)胞貼壁,如果有的話,你要用新的瓶子傳代,原來(lái)的培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿都不要了,這樣會(huì)好些,如果你要反復(fù)使用培養(yǎng)皿的話,要用大量的PBS洗,再用含血清的培養(yǎng)基洗一次才能繼續(xù)用;

4.你消化HT-144細(xì)胞之后有沒有離心清洗細(xì)胞,細(xì)胞消化下來(lái)之后要用含10ml血清的培養(yǎng)基離心洗一次;

0.05%的胰酶還是0.25%的胰酶原理是底濃度胰酶作用時(shí)間長(zhǎng)些,細(xì)胞能盡量散些是目的,胰酶保存的好,效果就好。

消化之前先用PBS洗兩次,然后加0.05%的胰酶消化2min,然后把胰酶吸棄,利用余下的胰酶消化3-5min(室溫或培養(yǎng)箱),HT-144;人惡性黑色素瘤細(xì)胞;HT-144細(xì)胞這期間每隔一分鐘在顯微鏡下觀察,看到細(xì)胞差不多都變圓了、且側(cè)立細(xì)胞有滑落的趨勢(shì),加2ml培養(yǎng)基吹打,吹成單細(xì)胞懸液。我的細(xì)胞這樣差不多就能吹散了。

HT-144細(xì)胞一團(tuán)一團(tuán)的,是傳代的時(shí)候沒吹散。37度消化4分鐘,拿前面較細(xì)的1ml槍頭吹的,然后就差不多能成單細(xì)胞了。你可以吹完后把它轉(zhuǎn)移到離心管中,讓它自然沉降8-10分鐘,然后取上層的細(xì)胞傳代,情況會(huì)好很多。

細(xì)胞聚團(tuán)還有一種可能是您使用的胎牛血清營(yíng)養(yǎng)成份不夠,建議復(fù)蘇一只新的細(xì)胞再培養(yǎng)。

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